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高效液相色谱仪常见故障的断定及解决

* 来源: 无锡赛那尔 * 作者: sainaer * 发表时间: 2019-06-21 9:16:47
      高效液相色谱仪一直以来就备受广大实验室爱好者的宠爱,操作简单、高效、结果完美。在此给您介绍部分高效液相色谱仪常见的故障的解决方法。
    

(一)高效液相色谱仪保留时间变化

  1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱

  2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱

  3。缓冲液容量不够用〉25mmol/L的缓冲液

  4。柱污染每天冲洗柱

  5。柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相

快乐时时彩  6.柱快达到寿命采用保护柱

  (二)高效液相色谱仪保留时间缩短

  1.流速增加检查泵,重新设定流速

  2。样品超载降低样品量

  3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向

  4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀

  5。温度增加柱恒温

  (三)高效液相色谱仪保留时间延长

  1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡

快乐时时彩  2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱

  3.键合相流失同前(二)3

  4.流动相组成变化同前(二)4

  5.温度降低同前(二)5

  (四)高效液相色谱仪出现肩峰或分叉

  1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%

快乐时时彩  2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂

快乐时时彩  3。柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件

  4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品

  5.进样器损坏更换进样器转子

  (五)高效液相色谱仪鬼峰

  1。进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗

  2.样品中未知物处理样品

  3。柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)

  4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂

  5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,

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  用HPLC级的水

快乐时时彩  (六)高效液相色谱仪基线噪声

  1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压

  2。污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂

  3。检测器灯连续噪声更换氘灯

  4.电干扰(偶然噪声)采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)

  5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压

  (七)高效液相色谱仪峰拖尾

  1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相

  2.峰干扰清洁样品,调整流动相

  3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品

  4。同前(四)4同前(四)4

  5.同前(四)35.同前(四)3

  6.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管

  7。柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱

  (八)高效液相色谱仪峰展宽

  1.进样体积过大同(四)1

  2.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散

  3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点

  4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%

  5。流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相

  6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器

  7。保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱

  8。柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小

  9.样品过载进小浓度小体积样品

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